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更新時間:2019-05-27 | 點擊率:1297
ColorQuest XT全自動比色計
采用的比色法(colorimetry)是生化檢測中很常用的方法,以生成有色化合物的顯色反應為基礎,通過比較或測量有色物質溶液顏色深度來確定待測組分含量。早在公元初古希臘人就曾用五倍子溶液測定醋中的鐵。1795年,外人也用五倍子的酒精溶液測定礦泉水中的鐵。但是,比色法作為一種定量分析的方法,大約開始于19世紀30~40年代。
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的的原理
比色法的理論依據(jù)是物質的顏色與光的關系,光是一種電磁波,自然是由不同波長(400~700nm)的電磁波按一定比例組成的}昆合光,通過棱鏡可分解成紅、橙、黃、綠、青、藍、紫等各種顏色相連續(xù)的可見光譜。如把兩種光以適當比例混合而產生白光感覺時,則這兩種光的顏色互為補色。當白光通過溶液時,如果溶液對各種波長的光都不吸收,溶液就沒有顏色。如果溶液吸收了其中一部分波長的光,則溶液就呈現(xiàn)透過溶液后剩余部分光的顏色。例如,我們看到KMnO4溶液在白光下呈紫色,就是因為白光透過溶液時,綠色光大部分被吸收,而紫色光透過溶液。同理,CuSO4溶液能吸收黃色光,所以溶液呈藍色。由此可見,有色溶液的顏色是被吸收光顏色的補色。吸收越多,則補色的顏色越深。比較溶液顏色的深度,實質上就是比較溶液對它所吸收光的吸收程度。
朗伯-比爾定律(Beer-Lambert Law),又稱比爾定律、比耳定律、布格-朗伯-比爾定律,是光吸收的基本定律,適用于所有的電磁輻射和所有的吸光物質,包括氣體、固體、液體、分子、原子和離子。比爾-朗伯定律是吸光光度法、比色分析法和光電比色法的定量基礎。光被吸收的量正比于光程中產生光吸收的分子數(shù)目 。
物理意義是當一束平行單色光垂直通過某一均勻非散射的吸光物質時,其吸光度A與吸光物質的濃度c及吸收層厚度b成正比,而透光度T與c、b成反比。
比爾-朗伯定律數(shù)學表達式
A=lg(1/T)=Kbc
A為吸光度,T為透射比(透光度),是出射光強度(I)比入射光強度(I0).
K為摩爾吸收系數(shù).它與吸收物質的性質及入射光的波長λ有關.
c為吸光物質的濃度,b為吸收層厚度.【b也常用L替換,含義一致】
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